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ELISA試劑盒在使用過程中要注意這些細節

更新時間:2020-11-13      點擊次數:1498
   ELISA試劑盒在使用過程中要注意這些細節
  ELISA試劑盒在國內有許多種叫法,例如:ELISA、ELISA Kit、酶聯免疫試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒、酶聯免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA、酶聯免疫吸附測定試劑盒等。
  ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA試劑盒可用于測定抗原,也可用于測定抗體。
  注意事項:
  1、試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
  2、濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
  3、各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
  4、請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD 值大于標準品孔孔的 OD 值) ,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(×n×5) 。
  5、嚴格按照ELISA試劑盒的說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。
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